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关于ELISPOT的问题 27 Aug 2013 | 03:13 pm
1、什么是elispot.html' target='_blank'>ELISPOT检测?
ELISPOT透明板及PVDF板的利弊 27 Aug 2013 | 03:13 pm
透明板在操作的时候比PVDF板稍微容易点，PVDF板在使用时要进行预处理板，操作时还要小心不要把那层膜捅破了。 透明板就是显示的斑点都是黑色的，不能进行几种因子的同时测定，而PVDF板就可以用斑点颜色的变化一次来测定几种细胞因子。 总结：都有优缺点，个人认为，测一种细胞因子的话还是透明板比较好。
ELISPOT与ELISA、有限稀释法等5种检测方法的区别 27 Aug 2013 | 03:13 pm
elispot.html' target='_blank'>ELISPOT的历史可以追溯到1963年Jerne等人创立的溶血空斑技术(hemo-lytic plaque forming cell assay ，HPF)，这项技术可用于检测并计数单个抗体形成细胞。随着单克隆抗体技术的成熟，1983年，Czerkinsky等采用此法检测脾细胞中分泌特异性抗体的细胞数，发现该方法敏感性高简便易行。后来，...
ELISPOT原理、步骤和发展 27 Aug 2013 | 03:13 pm
在免疫学领域中，对于疾病以及疫苗研究不仅仅局限于体液免疫应答(B细胞免疫)，细胞介导的免疫应答(cell mediated immune response，CMI)也是人们所关注的，而T细胞在CMI中起关键作用。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体，但由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同，使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合，而不能确切...
ELISA实验中缓冲溶液等试剂的配置 27 Aug 2013 | 03:13 pm
ELISA实验中是以抗原和抗体的免疫反应为基础，ELISA试剂以及各种溶液如何配置?最近刚做了下ELISA实验，把各种ELISA配置方法汇总如下：(1) ELISA实验包被缓冲液(2) ELISA实验洗涤缓冲液(2) ELISA实验洗涤缓冲液(3) ELISA实验稀释液;(4)ELISA实验终止液(5)ELISA底物缓冲液(6)ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液(7) ELISA实验ABT...
关于ELISPOT试验技术中对细胞的处理问题 27 Aug 2013 | 03:13 pm
1、提取外周血淋巴细胞时，有那些注意事项? 如果取外周血淋巴细胞(PBMC) 进行elispot.html' target='_blank'>ELISPOT检测，最好采用新鲜血液。在保证无菌操作的前提下，首先应保证取血时抗凝剂应及时充分的与血液混匀，避免血凝块的出现。抗凝血最好及时提取PBMC，避免放置时间过长，室温下避免过夜。应选用分离效果好的淋巴细胞分离液，避免PBMC中混有过多其他细胞成分...
免疫组化双染实验操作步骤 27 Aug 2013 | 03:13 pm
第一抗体的染色： 1、 将切片浸在3%H2O2甲醇溶液(新鲜配制)中10分钟，PBS冲洗2分钟×3次
自行配制western blot抗体洗脱液配方 27 Aug 2013 | 03:13 pm
老板说节约实验经费，试剂溶液能自己配置的就都自己配置，不买没必要的试剂。下面是我们实验室用的抗体洗脱液配方：主要是参考了分子克隆那本实验室宝典。
【推荐】免疫胶体金稀释液的原则总结 27 Aug 2013 | 03:13 pm
制备好免疫胶体金后，还需要将其稀释到一定浓度，并吸附于特殊的惰性介质中才能够最终制成产品。一般来说，特殊的介质常用的是玻璃纤维或无纺布。玻璃纤维和无纺布本身一般是疏水的，胶体金产业一般采用表面活性剂预处理过的玻璃纤维或无纺布，通常配方为1%Tween20+适量PVA。介质处理完成后，免疫胶体金稀释液的配伍才是最关键的。现总结原则如下：
免疫组化染色过程常见问题及解答 27 Aug 2013 | 03:13 pm
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色可以存在各种各样的问题，但从染色的结果看，一般可分为两类：无色片(即无阳性信号)和“杂音”染色片(有...
